- 赵芳;陈坤琳;邢光东;钱勇;曹少先;李隐侠;孟春花;张建丽;张俊;桂红兵;仲跻峰;王慧利;
为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)饲养层、基质胶(Matrigel)和贴附因子(attachment factor,AF)细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs(mESCs)自我更新及多能性维持的影响。结果表明:在KSR浓度为5%的N2B27培养基中,MEFs饲养层的mESCs形态立体,边缘清晰,呈规则的圆顶状; Matrigel、AF细胞培养板培养的mESCs形态立体,呈集落样生长。MEFs饲养层培养的mESCs传代后黏附快,集落形成显著快于Matrigel、AF细胞培养板,AF细胞培养板培养的mESCs黏附少,集落形成慢。免疫荧光染色结果显示,3种处理的mESCs均表达Oct4和Sox2蛋白,但AF细胞培养板培养的mESCs中Oct4、Sox2和Nanog的转录表达水平低于Matrigel细胞培养板,其中Sox2和Nanog差异显著或极显著(P <0.05或P <0.01)。说明AF可用于mESCs培养,但在细胞黏附、增殖速率及多能因子表达上与MEFs、Matrigel有差异。
2020年05期 v.28;No.134 1-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 2361K] - 赵增元;郭伟婷;毕江华;冯春涛;朱宏波;张普;孙建辉;王敏生;余文莉;李树静;
为了提高纯种西门塔尔牛冷冻胚胎分割后的半胚发育率,试验选取牛一级冷冻胚胎在胚胎保存液、mCR1aa(前期)液、mCR1aa(后期)液3组培养液中培养24 h,测定胚胎发育率;牛一级冷冻胚胎解冻后分为0,15,30,45,60,90,120 min组培养后进行分割,将对照组整胚和分割后的半胚培养24 h,测定胚胎发育率;牛一级冷冻胚胎分割后的半胚分为不经短暂培养(no short culture,NSC)和30 min组作为试验组,整胚分为NSC对照、30 min对照组,将4组胚胎分别装入含胚胎冷冻液的0.25 m L细管中,在4℃冰箱放置30 min,之后在室温(25℃)下推入胚胎保存液中洗3次,再培养24 h,测定各组胚胎发育率。将纯种西门塔尔牛一级冷冻胚胎利用优化后的分割条件进行二分操作,分为整胚、双半胚、单半胚,用胚胎移植枪直接移植到受体牛子宫角,并用双半胚进行同侧移植,测定受体母牛妊娠率、流产率、双犊率、犊牛成活率。结果表明:mCR1aa(前期)液组、mCR1aa(后期)液组胚胎发育率极显著高于胚胎保存液组(P <0.01);试验组中解冻后培养45 min组胚胎发育率最高,与对照组无显著差异(P> 0.05); NSC组胚胎发育率极显著高于30 min组(P <0.01);整胚、双半胚、单半胚组的妊娠率、流产率、犊牛成活率差异不显著(P> 0.05),双半胚组的双犊率极显著高于整胚组、单半胚组(P <0.01)。说明纯种西门塔尔牛冷冻胚胎解冻后用mCR1aa(后期)液培养45 min再分割,获得的半胚直接移植可有效提高冷冻胚胎利用效率和分割后半胚移植妊娠率。
2020年05期 v.28;No.134 8-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 191K] - 刘梦蝶;李志斌;房晓欢;王卓;聂雨欣;石霖静;李俊杰;
为研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid和DNA甲基转移酶抑制剂Zebularine对卵丘细胞重编程的影响,试验分别采用5 nmol/L Zebularine、0.2μmol/L Scriptaid单独或联合处理绵羊卵丘细胞12 h,用MTT法检测两种药物对卵丘细胞增殖的影响,用荧光定量PCR法检测Oct4、Sox2、GDF9、BMP15和DNMT1基因的表达情况。结果表明:Zebularine和Scriptaid联合处理和单独处理卵丘细胞后增殖率差异不显著(P> 0.05);单独Zebularine或Scriptaid处理卵丘细胞后Oct4表达量显著增加(P <0.05),联合处理对Oct4表达量无影响(P> 0.05);而对于转化生长因子BMP15、GDF9和多潜能基因Sox2,除Zebularine单独处理的卵丘细胞GDF9表达量显著增加(P <0.05)外,其他处理间均差异不显著(P> 0.05);两种药物单独及联合处理后卵丘细胞DNMT1表达量均显著降低(P <0.05)。说明Zebularine和Scriptaid单独及联合处理绵羊卵丘细胞对细胞增殖无显著影响(P> 0.05),但可提高多潜能基因(Oct4、Sox2)、细胞分化相关基因(BMP15、GDF9)表达量,降低DNMT1基因表达量。
2020年05期 v.28;No.134 14-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 844K] - 汪亮;丁良梅;刘娣;
睾丸支持细胞(sertoli cells,ST)是最重要的生殖相关细胞,对精子的发育具有重要的支持功能,DNA甲基转移酶3B(DNA methyltransferase 3 beta,DNMT3B)是参与表观遗传调控的重要基因之一,在猪的雄性遗传信息传递中具有重要的作用。为了探讨DNMT3B基因对猪睾丸支持细胞增值及下游相关基因表达的影响,试验通过在ST细胞系中过表达DNMT3B基因,借助细胞划痕试验检测细胞的迁移能力,通过荧光定量PCR方法检测其对部分组蛋白、热应激、凋亡相关基因表达的影响。结果表明:与对照组相比,过表达DNMT3B基因的猪ST细胞相对迁移速率受到抑制,在划痕后第24,48小时时抑制作用明显(P <0.05)。过表达DNMT3B基因后DNMT3A、HSF1、P53、C-myc相对表达量显著提高(P <0.05)。说明DNMT3B对特定的热应激和细胞凋亡基因有直接的影响,但未发现其对特定组蛋白相关基因有明显调节作用。
2020年05期 v.28;No.134 19-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 1564K]
- 梅山;杜旭旭;杨朝云;史远刚;淡新刚;
Kisspeptin是kiss1基因的产物,它不仅能显著影响动物的繁殖,也参与调控动物机体代谢、初情期启动及整个妊娠过程。近年来的诸多研究表明,kisspeptin及其受体GPR54在许多动物卵巢中表达,在卵泡发育、卵母细胞成熟、颗粒细胞增殖分化及类固醇合成中起着重要作用。文章就kisspeptin/GPR54在性腺上以旁分泌或自分泌方式调控卵泡发育进行了较为系统的归纳、总结,旨在全面了解kisspeptin/GPR54在卵巢中的定位、分布及调控卵泡发育中的作用和信号通路,为进一步研究kisspeptin/GPR54调控卵泡发育的具体分子机制奠定基础。
2020年05期 v.28;No.134 27-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K] - 付言峰;徐小波;俞正玉;王学敏;赵为民;任守文;
受非洲猪瘟疫情等的影响,生猪高效复产已成为畜牧业当前第一要务,而生猪复产的关键是母猪快速扩繁。为了提高母猪的繁殖力,文章从繁殖调控、遗传育种、营养调控和智能化控制四个方面进行了技术分析和总结,以期为生猪产业研究和技术人员提高母猪繁殖率提供参考。
2020年05期 v.28;No.134 33-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K] - 潘彩霞;
目前国内母犬发情抑制技术仍较为落后,主要采用手术切除卵巢法和药物法两种,前者对犬伤害性大且不可逆,后者使用的药品种类单一,效果不佳。为此,文章对近几年国外常用的抑制母犬发情的激素类药物(主要包括孕酮类、雄激素及GnRH-a)进行了介绍,简要说明了这几种药物的使用剂型、剂量及效果、使用后的不良反应及注意事项,以供研究人员借鉴。
2020年05期 v.28;No.134 38-41页 [查看摘要][在线阅读][下载 172K] - 孙金艳;彭福刚;赵秀华;李忠秋;刘国君;
鹅的繁殖具有季节性,因地域和品种不同及光照时长的差异,种鹅繁殖季节也不同,北方种鹅1—7月份产蛋,南方种鹅9月份—次年4月份产蛋。产蛋周期短、产蛋量少是制约鹅产业发展的重要因素。光照是调控下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)等与繁殖相关激素的重要因子。笔者从选种、营养、光照、温度等方面综述了种鹅繁殖性能调控,以提高种鹅繁殖性能,实现鹅产业标准化、规模化发展。
2020年05期 v.28;No.134 41-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 160K]